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人Elisa試劑盒與溫度的關系要弄清

更新時間：2015-03-03 點擊次數(shù)：1626次

　　人Elisa試劑盒繼50年代的免疫熒光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技術之后，在70年代初期又建立了用酶來標記抗原或抗體的分析技術。由于酶的生物催化作用，一個酶分子在數(shù)分鐘內可以催化幾十幾百個底物分子發(fā)生反應，產生了放大作用，人Elisa試劑盒使得原來極其微乎其微的抗原或抗體在數(shù)分鐘后就可被識別出來，這種技術被稱為酶聯(lián)免疫吸附試驗法(Enzyme—Linked Immunosorbent Assay，ELISA)，本法自70年代初期由VAN WEEMEN、SCHUARS.ENGVALL及PERLMARN等相繼分別報道后，現(xiàn)已引起廣泛重視。人Elisa試劑盒是免疫診斷中的一項新技術，現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據(jù)已經使用的結果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查，而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此，也適合于血清流行病學調查。人Elisa試劑盒本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。

　　因此人Elisa試劑盒在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大，可概括四個方面：

　　1.免疫酶染色各種細胞內成份的定位。

　　2.研究抗酶抗體的合成。

　　3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。

　　4.定量檢測體液中抗原或抗體成份。

　　人Elisa試劑盒濕盒應先放在保溫箱中預溫至劃定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應如斯?？乖贵w反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育，有人稱之為孵育，在人Elisa試劑盒中似不恰當。這就是為什么ELISA反應老是需要一定時間的溫育。為加速反應，可進步反應的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜采用更高的溫度。人Elisa試劑盒屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發(fā)生。

　　酶聯(lián)免疫吸附試驗法以其靈敏度高(可達 ng 甚至pg 水平)，特異性好等優(yōu)點，在生命科學各領域得到廣泛應用，人Elisa試劑盒已邁出醫(yī)藥、臨床領域，步入農業(yè)、漁業(yè)、畜牧業(yè)和食品加工業(yè)。低濃度的酶標抗體極容易受到高溫、微生物、以及蛋白酶的影響而失活，嚴重影響產品的貨架期，過去通常將酶標抗體凍干保存，然而這樣的保存，不僅由于在凍干的過程中會影響酶標抗體的活性，人Elisa試劑盒而且在臨床應用中頗為不便。適當?shù)木彌_液以及添加無關蛋白質、糖、防腐劑以及一些含氨基的化合物等都會對對酶標抗體的活性起一定的保護作用，因此我們設計了一組保護劑用于保護酶標抗體，與未添加任何糖蛋白的酶標抗體做對照，將經保護的人Elisa試劑盒酶標抗體及未保護的酶標抗體置于37℃烘箱中放置6天，考察保護液對酶標抗體的影響。

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